重组青霉素G酰化酶在枯草芽孢杆菌中的表达条件优化

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：allen75

【摘要】

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为获得巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶(PGA)的高产菌株和条件,构建了分泌表达PGA的基因工程枯草杆菌菌株,对表达条件进行了优化.以LB作为初始培养基,考察了温度、苯乙酸、装液量

【作者】

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黄鹤杨晟李仁宝黄晓冬袁中一

【机构】

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中国科学院上海生物化学研究所,山东新华制药厂

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2001年2期

【关键词】

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青霉素G酰化酶巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌基因表达条件优化 penicillin G acylase Bacillus megaterium Bacill

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为获得巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶(PGA)的高产菌株和条件,构建了分泌表达PGA的基因工程枯草杆菌菌株,对表达条件进行了优化.以LB作为初始培养基,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌PGA产量的影响.实验发现重组细胞产酶不再需要变温和苯乙酸诱导.充足的通气量和适当浓度的淀粉可使细胞密度及PGA表达量大为提高.表达条件优化后,菌体A600由3提高到20,PGA的表达量由3～6 U/ml提高到35～40 U/ml,为目前生产用巨大芽孢杆菌表达量的6倍.

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