蛹虫草类胡萝卜素酶法提取和TLC法纯化研究

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为了开发一种条件温和、安全环保的方法来分离纯化水溶性蛹虫草类胡萝卜素,通过试验筛选得到辅助提取蛹虫草类胡萝卜素的最佳酶为脂肪酶,并优化形成最佳工艺.蛹虫草子实体粉与水1∶4(m∶v)混匀,加入0.1%脂肪酶,于pH 8~8.5,50°C条件下酶解30 min;将酶解液的乙醇浓度调至60%,室温下静置提取90 min;离心收集上清液.用该工艺提取1次蛹虫草类胡萝卜素的含量为(1 747.8 ± 17.6)μg·g-1,显著高于直接浸提法的[(652.3 ± 24.9)μg·g-1]和超声辅助提取法[(661.5 ± 41.9)μg·g-1],P<0.01.通过试验筛选得到蛹虫草类胡萝卜素TLC纯化法的最佳展开剂配比为:0.5%乙酸水溶液∶乙醇∶正丁醇∶乙酸乙酯=12∶8∶24∶36.用该展开剂能分离形成4个清晰的条带.经HPLC对比分析,4个条带的溶出液在出峰时间和顺序上与文献报道的4种蛹虫草类胡萝卜素Cordyxanthin-Ⅰ、Cordyxanthin-Ⅱ、Cordyxanthin-Ⅲ、Cordyxanthin-Ⅳ分别一一对应,峰面积百分比分别为76.10%、95.90%、97.96%、81.53%.
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