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利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达甲型H5N1禽流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)并对其进行鉴定。
方法根据sf9昆虫细胞密码子偏好性，对A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)禽流感病毒的HA基因进行序列优化并全长合成。构建重组供体质粒pFastHA，经PCR及测序鉴定后，转化DH10Bac感受态细胞，获得重组穿梭质粒BacmidHA，用M13引物进行PCR鉴定。采用脂质体法转染sf9细胞，获得重组杆状病毒rBacHA。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)、蛋白质印迹法以及间接免疫荧光法对rBacHA表达产物进行分析。
结果供体质粒pFastHA经双酶切后产生了1条与预期大小相符的1 707 bp条带，序列测定证实目的基因无突变。穿梭质粒BacmidHA经PCR扩增，得到1条与预期大小相符的3 180 bp条带。SDS-PAGE结果显示，rBacHA表达产物的相对分子质量约为65 000。蛋白质印迹法分析表明，表达产物能与禽流感病毒阳性血清结合。在荧光显微镜下，感染rBacHA的sf9细胞呈现绿色荧光，提示HA基因得到表达。
结论利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功制备了具有良好抗原性的重组HA蛋白。