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目的
探讨含有血小板源性生长因子的载银介孔氧化硅(P-AG-MSN)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)血管化方法及效果。
方法2016年1月至2017年3月,取健康成年SD大鼠BMSCs,离心、洗涤、培养并传代后,进行细胞鉴定。第3代细胞分别用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)干预的诱导培养基(实验组)及完全培养基(对照组)培养,ELISA法检测P-AG-MSN对成骨样细胞分化相关因子分泌量;qRT-PCR法实时定量检测成骨样细胞以及成血管分化相关基因表达;Western blot法检测成骨样细胞OPG/RANKL通路关键因子OPG/RANKL蛋白的表达。所得数据进行统计学分析。
结果培养7 d,ELISA检测骨诱导相关基因(ALP、OPN、OCN和Runx2)在载银介孔氧化硅(AG-MSN)和P-AG-MSN之间差异无统计学意义(P>0.05)。BMSCs经过P-AG-MSN诱导后微血管网形成,在P-AG-MSN的作用下,BMSCs分泌的VEGF明显增多,HIF-1α、HGF和Ang-1的表达也明显增加。
结论P-AG-MSN可明显促进BMSCs的成骨相关基因OCN、OPN、Runx2等表达,促进其诱导微血管网形成,并使其分泌的VEGF、HIF-1α、HGF和Ang-1的表达明显增加,因此其可能在促进组织工程材料血管化的过程中起到重要作用。