目的 高糖、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)培养小鼠肾小球足细胞,观察足细胞形态学改变;观察损伤环境下足细胞蛋白激酶C(PKC)活性、nephrin、CD2AP mRNA表达、细胞凋亡情况.方法 培养条件永生化小鼠足细胞株,经传代、诱导分化后分为6组:对照组、高葡萄糖组、高Ang-Ⅱ组、混合组、PKC抑制剂干预组及甘露醇高渗对照组.各组培养72 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率;并分别于培养的24、48 h进行各组PKC活性测定(ELISA法)、RT-PCR检测nephrin、CD2AP mRNA的表达.结果 (1)高糖、高Ang-Ⅱ作用24 h后,足细胞PKC活性较对照组明显升高[(47.09±1.19) pmol/L vs (42.93±0.71) pmol/L,P ＜0.05],混合组升高更显著[(58.75 ±0.71)pmol/L,P＜0.01],48 h各组PKC活性较同组24 h升高(P＜0.05);(2)高糖组、高Ang-Ⅱ组足细胞nephrin mRNA表达较对照组减少(56.87±0.74,48.54±0.86,P＜0.05),混合组减少的程度更加明显(11.7±1.54,P＜0.01),PKC抑制剂干预组nephrin mRNA的表达较混合组有所增高,差异有统计学意义(62.79±1.53,P＜0.05),随着作用时间延长,各损伤环境下nephrin mRNA表达逐渐减少;(3)在损伤环境作用初期24h时,高糖组、高Ang-Ⅱ组CD2AP mRNA表达与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),48 h后高糖组、高Ang-Ⅱ组及混合组CD2AP mRNA的表达均低于对照组(56.09±1.46、67.68±2.58、54.08±2.74,P＜0.05),干预组CD2AP mRNA的表达较混合组有所增高,差异有统计学意义(90.75±1.33,P＜0.05);(4)培养48、72 h后高糖组、高Ang-Ⅱ组及混合组足细胞凋亡率与对照组比较升高(P＜0.05),PKC抑制剂干预组于72 h时显示出降低细胞凋亡的趋势.结论 高糖、Ang-Ⅱ可激活足细胞PKC活性,下调足细胞nephrin、CD2AP mRNA表达,诱导足细胞凋亡.PKC通路的激活参与了高糖、Ang-Ⅱ对足细胞nephrin、CD2AP mRNA表达的影响。
高糖环境下Ang-Ⅱ对小鼠足细胞损伤机制研究
【摘 要】
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目的 高糖、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)培养小鼠肾小球足细胞,观察足细胞形态学改变;观察损伤环境下足细胞蛋白激酶C(PKC)活性、nephrin、CD2AP mRNA表达、细胞凋亡情况.方法 培养条件永生化小鼠足细胞株,经传代、诱导分化后分为6组:对照组、高葡萄糖组、高Ang-Ⅱ组、混合组、PKC抑制剂干预组及甘露醇高渗对照组.各组培养72 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率;并分别于培养的24、48 h
【机 构】
：
030001太原,山西省人民医院内分泌科,北京市空港医院内分泌科,山西省临汾市人民医院内分泌科,030001太原,山西省人民医院内分泌科
【出 处】
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中国医师杂志
【发表日期】
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2014年16期
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