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根据牛Y染色体特异重复序列设计了一对引物，同时设计了一对牛常染色体引物作内标引物，研究了引物浓度、dNTP浓度、Mg^2＋浓度、酶浓度、退火温度以及循环次数等因素对PCR方法鉴定牛胚胎性别的影响。试验结果表明，引物浓度、退火温度和循环次数对该反应体系影响较大，而dNTP浓度、Taq酶含量以及Mg^2＋浓度的影响较小。