【摘 要】
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目的 探讨circ_0013958对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法 选取2017年6月至2020年6月收治胶质瘤患者的脑组织标本23例,以23例内减压术获得的正常脑组织作为作对照,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0013958和miR-622的表达水平.将胶质瘤细胞株U251分为si-NC组、si-circ_0013958组、miR-NC组、miR-622组、si-circ_0013958+anti-miR-NC组、si-circ_0013958+anti-m
【机 构】
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629000 四川省遂宁市第一人民医院神经内科
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目的 探讨circ_0013958对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法 选取2017年6月至2020年6月收治胶质瘤患者的脑组织标本23例,以23例内减压术获得的正常脑组织作为作对照,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0013958和miR-622的表达水平.将胶质瘤细胞株U251分为si-NC组、si-circ_0013958组、miR-NC组、miR-622组、si-circ_0013958+anti-miR-NC组、si-circ_0013958+anti-miR-622组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验验证circ_0013958和miR-622的靶向关系.结果 与正常脑组织比较,胶质瘤组织中circ_0013958表达水平升高,miR-622表达水平降低(P<0.05).干扰circ_0013958表达后,胶质瘤U251细胞中circ_0013958表达水平降低,细胞活性降低,Ki-67蛋白表达水平降低,细胞的迁移侵袭数减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05).Circular RNA Interactome预测显示circ_0013958的序列中含有与miR-622互补的核苷酸序列).WT-circ_0013958与miR-622共转染后的细胞荧光素酶活性降低(P0.05).与pcDNA组比较,pcDNA-circ_0013958组miR-622表达水平降低;与si-NC组比较,si-circ_0013958组miR-622表达水平升高(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-622组胶质瘤U251细胞中miR-622表达水平升高,细胞活性降低,迁移和侵袭细胞数减少,Ki-67、MMP-2、MMP-9表达水平降低(P<0.05).与si-circ_0013958+anti-miR-NC组比较,si-circ_0013958+anti-miR-622组胶质瘤U251细胞中miR-622表达水平降低,细胞活性升高,迁移和侵袭细胞数增加,Ki-67、MMP-2、MMP-9表达水平升高(P<0.05).结论 干扰circ_0013958表达可能通过靶向上调miR-622抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭.
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