【摘 要】
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目的 观察二氢杨梅素对血管内皮细胞线粒体自噬的影响,并探讨Prohibitin 2在其中的作用.方法 用不同浓度(0、0.1、1、10、100μmol/L)二氢杨梅素处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 12 h后,流式细胞术和荧光显微镜观测MitoTracker⑤Deep Red(MTDR)荧光强度,RT-PCR和Western blot分别检测Prohibitin 2 mRNA及其蛋白表达.用氯喹预处理HUVECs 1
【机 构】
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400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室;400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系营养与食品卫生学教研室
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目的 观察二氢杨梅素对血管内皮细胞线粒体自噬的影响,并探讨Prohibitin 2在其中的作用.方法 用不同浓度(0、0.1、1、10、100μmol/L)二氢杨梅素处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 12 h后,流式细胞术和荧光显微镜观测MitoTracker⑤Deep Red(MTDR)荧光强度,RT-PCR和Western blot分别检测Prohibitin 2 mRNA及其蛋白表达.用氯喹预处理HUVECs 1 h后,再用不同浓度二氢杨梅素处理12 h或10 μmol/L羰基氰化物间氯苯腙(线粒体自噬激动剂)处理6h,流式细胞术检测线粒体自噬.另用control siRNA或Prohibitin 2 siRNA转染HUVECs后,再用二氢杨梅素处理12h,流式细胞术检测细胞线粒体自噬.结果 与无二氢杨梅素(0μmol/L)处理相比,≥0.1 μmol/L二氢杨梅素处理显著降低血管内皮细胞MTDR荧光强度;同时,二氢杨梅素处理可明显增加Prohibitin 2 mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05);当以氯喹预处理抑制溶酶体功能后,与无二氢杨梅素处理相比,≥10 μmol/L二氢杨梅素处理可以显著增加血管内皮细胞线粒体自噬,与羰基氰化物间氯苯腙效应相一致(P＜0.05).与control siRNA处理组相比,以siRNA转染沉默Prohibitin 2后二氢杨梅素对线粒体自噬的诱导作用被明显抑制(P＜0.05).结论 二氢杨梅素可通过调控Prohibitin 2增强血管内皮细胞线粒体自噬.
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