【摘 要】
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目的:探讨肌肽对β 磷酸甘油诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化形成的影响及可能的机制.方法:原代分离和培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为对照组(正常培养液)、钙化组(10mMβ-磷酸甘油)和干预组(10mMβ-磷酸甘油和10mM肌肽),连续处理10d.茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)活性测定各组细胞钙化情况,Western Blot测定BMP-2、Runx2、Cleaved-caspase3、β-catenin、GSK-3β(Ser9)的蛋白表达.结果:β-磷酸甘油处理后,VSMCs出现钙化,与对照
【机 构】
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长江大学附属黄冈市中心医院心内科, 湖北 黄冈 438000
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目的:探讨肌肽对β 磷酸甘油诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化形成的影响及可能的机制.方法:原代分离和培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为对照组(正常培养液)、钙化组(10mMβ-磷酸甘油)和干预组(10mMβ-磷酸甘油和10mM肌肽),连续处理10d.茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)活性测定各组细胞钙化情况,Western Blot测定BMP-2、Runx2、Cleaved-caspase3、β-catenin、GSK-3β(Ser9)的蛋白表达.结果:β-磷酸甘油处理后,VSMCs出现钙化,与对照组比较,钙盐沉积显著增加,碱性磷酸酶活性明显上调,成骨标志物BMP-2、Runx2蛋白表达显著升高;与钙化组比较,肌肽能显著减少钙盐沉积、降低碱性磷酸酶活性,下调BMP-2、Runx2蛋白表达.细胞凋亡结果显示,钙化组Cleaved-caspase3蛋白表达显著上调,肌肽明显降低Cleaved-caspase3水平.信号通路蛋白检测发现,β-磷酸甘油下调GSK-3β(Ser9)蛋白表达,上调 β-catenin蛋白表达,肌肽可明显反转这一作用.结论:肌肽可抑制由高磷诱导的VSMCs钙化,其机制可能与抑制 β-catenin信号通路调控的成骨因子转录生成和细胞凋亡有关.
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