人羊膜间充质干细胞混合培养及向神经样细胞分化

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dygaalove4390
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目的 观察羊膜间充质干细胞(HAMs)可诱导分化为神经样细胞混合培养的生长以及经碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导HAMs向神经样细胞分化.方法 采用细胞分离和培养技术获取HAMs,分离HAMs后传代培养,加入bFGF诱导分化.当细胞传至第3代时,随机取培养的6份HAMs(半量)为A组,6份HAMs(半量)为B组,将A、B组各剩余的半量HAMs混合为C组.3组细胞密度均为1.0 x 107/L.以活细胞计数和噻唑蓝(MTT)比色法比较3组细胞扩增数量,免疫组织化学法检测HAMs胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)的表达.以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量,免疫组织化学检测HAMs神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达.结果 活细胞计数结果显示,第18天A组HAMs为(4.80±1.49)×104个,B组HAMs为(5.00±1.75) xl04个,C组HAMs为(8.90±3.46)×104个.MTT比色检测结果均显示,第18天A组HAMs为0.242±3.408,B组HAMs为0.245±5.226,C组HAMs为0.321 ±1.321(P <0.05).经bFGF诱导后均表达GFAP 、NSE和Nestin.结论 混合HAMs之间有互相促增殖作用,HAMs具有较强的可塑性,经bFGF诱导的HAMs可表达GFAP、NSE和Nestin。

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