【摘 要】
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目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对过氧化氢(H2O2)、羟自由基及肿瘤坏死因子α(TNF-α)致血管内皮细胞损伤的防护作用. 方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株Eahy-926;建立H2
【机 构】
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首都医科大学附属北京安贞医院,北京市心肺血管病研究所药理研究室
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目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对过氧化氢(H2O2)、羟自由基及肿瘤坏死因子α(TNF-α)致血管内皮细胞损伤的防护作用. 方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株Eahy-926;建立H2O2、羟自由基及TNF-α致内皮细胞损伤的模型;噻唑蓝(MTT)比色法测定内皮细胞活力;烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)动力学法检测内皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出;双波长荧光光度法测定胞内游离钙浓度;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血管内皮细胞黏附因子1(VCAM-1)的释放水平,观察HSYA对内皮细胞的影响. 结果 与模型组比较,HSYA处理组在25.0 μmol/L浓度时即可明显抑制H2O2诱导的内皮细胞活力下降(P＜0.05),细胞存活率为82.0%;HSYA处理组对H2O2(200.0 μmol/L)致内皮细胞损伤LDH,漏出有抑制作用,在HSYA 500.0 μmol/L浓度时差异有统计学意义(P＜0.01);HSYA处理组可明显抑制羟自由基H2O2/Fe2+体系致EAhy926细胞LDH的漏出,并呈现出明显的体外浓度依赖性;HSYA在浓度5.0 μmol/L时即可明显降低FE340/FE380值(P＜0.01),提示HSYA可明显抑制H2O2(200.0 μmol/L)介导EAhy926胞内游离Ca2+浓度升高,并呈体外浓度依赖性;HSYA在浓度1、5、25 μmol/L时均可明显抑制TNF-α诱导的内皮细胞VCAM-1的高表达(与模型组比较P＜0.05或P＜0.01),VCAM-1水平分别为(406±4)、(352±14)、(348±4)ng/L. 结论 HSYA有缓解血管内皮细胞氧化损伤的作用,并能抑制TNF-α诱导的炎性递质VCAM-1的高表达.
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