【摘 要】
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目的 制作理想的大鼠星形胶质细胞的损伤模型,观察形态变化.方法 使用生后3d内的SD乳鼠大脑皮质制成细胞悬液后,采用含15 %的胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,通过差速贴壁和不
【基金项目】
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江苏省卫生厅医学发展基金;苏州市社会发展基金
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目的 制作理想的大鼠星形胶质细胞的损伤模型,观察形态变化.方法 使用生后3d内的SD乳鼠大脑皮质制成细胞悬液后,采用含15 %的胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,通过差速贴壁和不同速度的摇床及逐渐传代纯化星形胶质细胞.采用PBS缓冲液代替培养基模拟缺营养模型,缺营养3h后恢复营养,观察细胞缺营养前后形态变化.同时使用RT-PCR 检测损伤后星形胶质细胞GFAP mRNA表达的变化来明确缺营养损伤模型中星形胶质细胞对缺营养损伤的反应.结果 缺营养3h后部分细胞胞体变小,胞突变短,个别细胞呈圆形,复营养后大多数细胞胞体变大,胞突变长并相互交错,基本恢复缺营养前形态,仍然可见少数细胞死亡漂浮在贴壁细胞层面上.RT-PCR检测发现损伤后星形胶质细胞GFAP mRNA表达较正常组明显增强,且有统计学意义.结论 通过上述方法培养后可获得高纯度的星形胶质细胞,原代星形胶质细胞可耐受一定的缺营养损伤,恢复营养后可基本恢复至损伤前的形态.
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