【摘 要】
：
目的 对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础.方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达.重组蛋白His6-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化.采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析.结果 成功构建重组表达质粒pET28
【机 构】
：
大理大学基础医学院病原生物学综合实验室,云南大理671000;大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室
论文部分内容阅读
目的 对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础.方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达.重组蛋白His6-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化.采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析.结果 成功构建重组表达质粒pET28a-vraR,在22℃、0.5 mmol/L IPTG诱导12h高效表达重组蛋白His6-VraR.分析重组His6-VraR序列,与金黄色葡萄球菌VraS/VraR核苷酸同源性皆为82％,氨基酸同源性分别为92％/94％,氨基酸组成差异主要存在VraS的胞外区和VraR的CheY结构域.结论 成功表达并纯化表皮葡萄球菌VraR蛋白,生物信息学分析表皮葡萄球菌VraSR的功能,可能不同于金黄色葡萄球菌.
其他文献
椎间盘源性腰痛是慢性腰痛的常见类型,是导致残疾的首要原因之一,给社会带来了巨大的经济负担.由于椎间盘解剖结构的特殊性,目前关于椎间盘源性腰痛的具体机制尚不清楚,其诊断及治疗尚未达成统一共识.国内外对于椎间盘源性腰痛的治疗主要包括保守治疗及外科手术治疗,治疗的目的是缓解临床症状,而不是从根本上逆转椎间盘退变.近年来生物治疗开始兴起,为椎间盘源性腰痛的治疗提供了新的方向,但国内关于生物治疗的相关研究报道较少.本文就椎间盘源性腰痛的诊断及治疗进展作一综述,以期为临床提供相关参考.
目的 观察新型冠状病毒肺炎患者血清中特异性抗体在COVID-19病程发展中的动态变化,比较SARS-CoV-2 IgM等5种抗体的阳性率,分析主要抗体水平在病程不同阶段的消长规律.方法 采用磁微粒化学发光免疫分析法对COVID-19患者血清中SARS-CoV-2 IgM、SARS-CoV-2 IgG、SARS-CoV-2 IgA和SARS-CoV-2-RBD Ab以及SARS-CoV-2 NAb中和抗体水平进行动态检测和分析.结果 在急性期新冠病人筛查中,SARS-CoV-2 IgG、IgM和IgA抗体检