两种PCR方法对检测A组轮状病毒膜芯片杂交结果的影响

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A组轮状病毒(rotavirus,RV)是导致全世界婴幼儿腹泻的最主要病原,危害巨大.拟用RT-巢式PCR技术对A组RV的保守序列进行高度扩增,通过同本室自制的膜芯片杂交,实现对该病毒的检测.分别采用对称PCR和不对称PCR扩增,均可得到扩增的目的片段.对称式扩增产物杂交结果不理想.而不对称式扩增得到了大量待检单链产物,同膜芯片杂交获得了理想的杂交结果.显著地提高了对A组RV杂交检测的灵敏度.表明不对称式PCR扩增是一种制备用于芯片杂交大量单链产物的理想方法,尤其是针对富含AT的核酸检测区域.
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