【摘 要】
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目的构建猪链球菌2型05ZYH33ABC转运蛋白SSU05_0946突变株，并对其致病机制进行初步探索，为进一步阐明猪链球菌逃避宿主固有免疫提供新线索。方法提取05ZYH33基因组作模板扩增SSU05_0946上下游同源臂，提取pSET1载体作模板扩增氯霉素基因，通过重叠PCR方法将3个片段搭建并连接至温敏载体pSET4s；通过同源重组技术构建突变株05ZYH33Δ0946；通过细菌黏附试验、全血
【机 构】
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目的构建猪链球菌2型05ZYH33ABC转运蛋白SSU05_0946突变株，并对其致病机制进行初步探索，为进一步阐明猪链球菌逃避宿主固有免疫提供新线索。
方法提取05ZYH33基因组作模板扩增SSU05_0946上下游同源臂，提取pSET1载体作模板扩增氯霉素基因，通过重叠PCR方法将3个片段搭建并连接至温敏载体pSET4s；通过同源重组技术构建突变株05ZYH33Δ0946；通过细菌黏附试验、全血杀伤试验、小鼠和仔猪攻毒试验评价突变株和野生株在致病方面的差异。
结果成功构建了突变株05ZYH33Δ0946；细菌黏附证明SSU05_0946与猪链球菌对宿主的黏附无关；全血杀伤证明SSU05_0946是猪链球菌一个新的抗吞噬因子；小鼠和仔猪毒力结果证明SSU05_0946是猪链球菌的一个新毒力因子。
结论猪链球菌2型ABC转运蛋白SSU05_0946是新发现的毒力因子，在猪链球菌抗宿主固有免疫中发挥重要作用。
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