微小RNAmiR-26a的克隆及其慢病毒表达载体的构建

来源 :热带医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tjyydtj1

【摘要】

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目的克隆微小RNAhsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-26。前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体，双酶切后测序鉴定

【作者】

：

鲁娟王爽揭荣荣姚开泰

【机构】

：

南方医科大学肿瘤研究所,南方医科大学病理学教研室,南方医科大学中医药学院

【出处】

：

热带医学杂志

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

hsa-miR-26a 肿瘤慢病毒 hsa-miR-26a tumor lentivirus

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目的克隆微小RNAhsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-26。前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体，双酶切后测序鉴定。筛选阳性克隆。用pIVTHM-miR-26a、psPAX2和pMD2-G3质粒共转染包装细胞293FT，包装产生慢病毒，以293FT细胞绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的表达水平测定病毒滴度。结果经双酶切鉴定和测序证实，成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体p

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