转化生长因子β1对人腹膜间皮细胞结缔组织生长因子的影响

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a_yelang
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目的 观察转化生长因子(TGF)β1对人腹膜问皮细胞(HPMCs)结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA和蛋白表达影响并探讨其可能的机制.方法原代培养HPMCs,用5 ng/ml TGF-β1刺激第3代细胞,采用免疫组织化学染色、Western印迹、ELISA和RT-PCR等方法,观察CTGF的mRNA和蛋白表达、纤连蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的mRNA和蛋白表达,细胞内磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)的蛋白表达以及在细胞内的迁移.结果(1)刺激组CTGF的mRNA表达与对照组比均显著增加,其中48 h为峰值;对照组细胞内仅有少量CTGF的蛋白表达,在TGF-β1刺激后24 h表达明显增加,48 h达峰值.(2)刺激组FN和Col I的mRNA表达与对照组比均呈时间依赖性显著增加,上清液FN和细胞内Col I的蛋白表达与对照组比也呈时间依赖性显著增加.(3)对照组细胞内几乎不表达p-Smad2/3(阳性细胞率3%),在刺激后15 min表达增加(29%),细胞着色主要分散在胞质中;1 h增加最明显(84%),细胞着色加深且集中在胞核及周边;2 h明显回落(37%),细胞着色转淡并又分散至胞质中.结论TGF-β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内CTGF的转录和蛋白表达,可能与TGF-β1激活了HPMCs内Smad信号通路有关。

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