【摘 要】
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目的观察长链非编码RNA－肺腺癌转移相关转录子1(LncRNA－MALAT1)对食管癌细胞EC－109侵袭和转移的影响，并探讨其可能的作用机制。方法应用慢病毒载体shRNA对照、shRNA－MALAT1转染EC－109细胞，采用实时荧光定量PCR法检测EC－109细胞中LncRNA－MALAT1、miR－200a、ZEB1和ZEB2 mRNA的表达；采用细胞侵袭实验检测EC－109细胞的侵袭能力；
【机 构】
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目的观察长链非编码RNA－肺腺癌转移相关转录子1(LncRNA－MALAT1)对食管癌细胞EC－109侵袭和转移的影响，并探讨其可能的作用机制。
方法应用慢病毒载体shRNA对照、shRNA－MALAT1转染EC－109细胞，采用实时荧光定量PCR法检测EC－109细胞中LncRNA－MALAT1、miR－200a、ZEB1和ZEB2 mRNA的表达；采用细胞侵袭实验检测EC－109细胞的侵袭能力；采用免疫荧光、Western blot法检测EC－109细胞中上皮间质转化(EMT)信号通路相关蛋白的表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测EC－109细胞中MALAT1与miR－200a表达的关系。
结果实时荧光定量PCR检测结果显示，未转染组、转染shRNA对照组和转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中MALAT1 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.97±0.08和0.43±0.06，转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中MALAT1 mRNA的表达明显降低(P<0.01)。未转染组、转染shRNA对照组和转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中ZEB1 mRNA的相对表达量分别为1.00、1.06±0.07和0.64±0.04，ZEB2 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.98±0.05和0.51±0.04，转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中ZEB1和ZEB2 mRNA的相对表达量均明显降低(均P<0.05)。转染shRNA－MALAT1组的EC－109细胞的穿膜细胞数为(96.81±10.43)个/低倍视野，与转染shRNA对照组EC－109细胞的穿膜细胞数[(278.44±13.28)个/低倍视野]比较，差异有统计学意义(P<0.01)。免疫荧光和Western blot法检测结果显示，沉默EC－109细胞中MALAT1基因的表达可下调EMT信号通路相关蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验结果显示，与转染miRNA阴性对照组比较，共转染pmirGLO－MALAT1－wt和miR－200a模拟物可明显减少EC－109细胞的荧光素酶活性，而共转染pmirGLO－MALAT1－mut和miR－200a模拟物不能抑制EC－109细胞的荧光素酶活性。
结论LncRNA－MALAT1可能作为竞争性内源RNA，竞争性结合miR－200a，从而上调EC－109细胞中ZEB1和ZEB2的表达，促进EMT进程，导致食管癌的侵袭和转移。
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