探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因表达对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)激活表达E-选择素的分子机制。
方法将同源盒转录因子(HOXA9)小干扰RNA(siRNA)短序列转染至对数生长期的HUVEC，采用实时荧光定量聚合酶链反应(实时qPCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测其对HOXA9 mRNA和蛋白表达的影响；另设空白对照组和无意序列nonsilence阴性对照组。取已经稳定转染pRNA-u6.1/Neo-HMGB1 shRNA质粒的HUVEC(低表达HMGB1的HUVEC)，采用实时qPCR法检测HOXA9和E选择素的mRNA表达；另设nonsilence转染组作为阴性对照。将HOXA9 siRNA转染至低表达HMGB1的HUVEC中作为共同转染组，采用实时qPCR法检测E-选择素的mRNA表达；以HMGB1 shRNA组和HOXA9 nonsilence组作为对照。
结果①空白对照组HOXA9 mRNA(2-ΔΔCT)和蛋白(积分A值)表达分别为1.094±0.115和1.031±0.060。与无意序列nonsilence转染组比较，HOXA9 siRNA转染组可显著降低HUVEC细胞中HOXA9的mRNA和蛋白表达〔HOXA9 mRNA(2-ΔΔCT)：0.257±0.030比1.035±0.091，t＝14.010，P＝0.002；HOXA9蛋白(积分A值)：0.278±0.042比0.975±0.014，t＝27.310，P＝0.002〕。②与nonsilence转染组比较，HMGB1 shRNA转染上调了HUVEC中HOXA9 mRNA(2-ΔΔCT)表达(2.519±0.278比0.856±0.063，t＝10.100，P＝0.001)，同时下调了E-选择素mRNA(2-ΔΔCT)表达(0.311±0.046比1.080±0.201，t＝7.415，P＝0.000)。③与HOXA9 nonsilence组及HMGB1 shRNA组比较，HMGB1 shRNA和HOXA9 siRNA共同转染后HUVEC细胞中E-选择素mRNA(2-ΔΔCT)表达明显升高(3.445±0.428比1.085±0.212、1.004±0.104，t1＝8.507，t2＝9.603，均P<0.001)。
结论HMGB1在HUVEC细胞核内可能通过HOXA9调节E-选择素的表达。