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【摘要】目的:通过研究不同浓度盐度对丹参的生长以及总酚含量的影响。方法:采用培养皿培养种苗,大盆移栽的方式,利用不同浓度的盐度(0,4,5,6 dSm-1)进行灌溉,灌溉3周后,测定丹参重量及酶标仪检测丹参总酚含量。结果:盐胁迫使丹参的重量及总酚含量下降。
【关键词】盐度;胁迫;重量;总酚含量
【中图分类号】R282.2 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714(2019)08-0104-01
丹参是唇形科植物丹参的干燥根和根茎。具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血止痈的功效,药用历史悠久,为我国大宗中药材之一。盐胁迫会通过离子毒害和渗透胁迫对丹参的生长、发育、生理生化代谢、繁殖以及地理分布等均会产生重要的影响。
1材料与方法
1.1丹参种子处理
为了打破种子休眠,将丹参种子在沸水中浸泡10分钟,然后放入用蒸馏水润湿的培养皿中,并在冰箱中(4℃)保存7天,7d后将种子播种在含有淤泥和粉末叶子的塑料罐中(1:2)并在温室中生长,其平均昼,夜温度和相对湿度分别为29±4/17±2℃和38±5/50±5%。种子萌发后60天,将具有两个节和四个相对叶的均匀幼苗移植到大塑料盆(30×50em)中。每盆用10kg空气干燥的土壤填充,每盆使用五个幼苗。
1.2种苗分组
移栽后8周,将丹参种苗分为6组,分别为氯化钠组(氯化钠浓度为2,3,4,5,6 dSm-1)和空白对照组(加蒸馏水)。为了防止对幼苗的渗透冲击,在持续3周的几个阶段逐渐加入盐溶液。为了保持土壤盐浓度水平恒定,在随后的灌溉中使用蒸馏水。在盐处理结束时,通过EC计测定总土壤盐度。3周后出现用高盐浓度处理的植物的盐胁迫症状(叶尖萎黄和坏死)。此时,收获幼苗。
1.3增长参数测量
将丹参单独称重以获得其新鲜重量,然后置于网袋中。将袋子在设定为70℃的烘箱中保持72小时,并通过分析天平测定枝条和根干重。
1.4总酚提取
将收获的丹参全草在室温下干燥1周。通过在2mL甲醇-乙酸(85:15v/v)中搅拌200 mg干叶粉来提取全草中总酚。将提取物在黑暗中保持在-18℃。24小时后,将提取物超声处理15分钟,并在冷冻离心机中以10000 r/min离心20分钟。除去上清液;加入正己烷(1:1v/v)并充分混合。将混合物在冷冻离心机中以10000 r/min离心20分钟。通过0.2μm膜滤器过滤并储存在-18℃下用于将来的分析。
1.5总酚类测量
通过Folin-Ciocalteu方法測定总酚含量。将200微升稀释的样品加入1mL 1:10稀释的Folin-Ciocaheu试剂中。摇动混合物并静置6分钟,然后加入800 μL7%Na2CO3溶液。在23℃温育90分钟后,通过酶标仪BioTek ELx808在760nm处读取溶液吸光度。使用没食子酸(0-500mg/L)的溶液制备标准曲线。毫克没食子酸量=(mgAGE·g-1)/g叶干重。
2结论
2.1盐胁迫对植物生长的影响
NaCl浓度的增加对丹参鲜重和干重的影响见表1。在外部NaCl为6 dSm-1时,与对照组相比,根干重减少了41%;枝条干重减少了28%。在外部NaCl盐度5和6 dSm-1时,枝条鲜重分别降低了14.5%和43%。然而,与对照组相比,中等盐度(4 dSm-1)下生长丹参,盐度不显着影响地上部干重。
2.2盐胁迫对总酚含量的影响
与没食子酸标准溶液相比,与Folin-Ciocalteu试剂反应的丹参提取物溶液的吸光度值如图1所示。盐处理显着降低丹参总酚类化合物。在6 dSm-1 NaCl下,总酚含量为3.47 mgAGE g-1 DW,为对照组含量的36.5%,见图1。
3讨论
盐胁迫能够影响丹参全草的干重及鲜重,其中5 dSm-1、6 dSm-1的盐浓度影响较明显,中浓度的盐溶液对枝条和根鲜重和干重的影响不是很大。
盐胁迫能够降低丹参全草中总酚的含量,其中5 dSm-1、6 dSm-1的盐浓度影响较明显,两组分别为对照组的76.5%、36.5%
【关键词】盐度;胁迫;重量;总酚含量
【中图分类号】R282.2 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714(2019)08-0104-01
丹参是唇形科植物丹参的干燥根和根茎。具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血止痈的功效,药用历史悠久,为我国大宗中药材之一。盐胁迫会通过离子毒害和渗透胁迫对丹参的生长、发育、生理生化代谢、繁殖以及地理分布等均会产生重要的影响。
1材料与方法
1.1丹参种子处理
为了打破种子休眠,将丹参种子在沸水中浸泡10分钟,然后放入用蒸馏水润湿的培养皿中,并在冰箱中(4℃)保存7天,7d后将种子播种在含有淤泥和粉末叶子的塑料罐中(1:2)并在温室中生长,其平均昼,夜温度和相对湿度分别为29±4/17±2℃和38±5/50±5%。种子萌发后60天,将具有两个节和四个相对叶的均匀幼苗移植到大塑料盆(30×50em)中。每盆用10kg空气干燥的土壤填充,每盆使用五个幼苗。
1.2种苗分组
移栽后8周,将丹参种苗分为6组,分别为氯化钠组(氯化钠浓度为2,3,4,5,6 dSm-1)和空白对照组(加蒸馏水)。为了防止对幼苗的渗透冲击,在持续3周的几个阶段逐渐加入盐溶液。为了保持土壤盐浓度水平恒定,在随后的灌溉中使用蒸馏水。在盐处理结束时,通过EC计测定总土壤盐度。3周后出现用高盐浓度处理的植物的盐胁迫症状(叶尖萎黄和坏死)。此时,收获幼苗。
1.3增长参数测量
将丹参单独称重以获得其新鲜重量,然后置于网袋中。将袋子在设定为70℃的烘箱中保持72小时,并通过分析天平测定枝条和根干重。
1.4总酚提取
将收获的丹参全草在室温下干燥1周。通过在2mL甲醇-乙酸(85:15v/v)中搅拌200 mg干叶粉来提取全草中总酚。将提取物在黑暗中保持在-18℃。24小时后,将提取物超声处理15分钟,并在冷冻离心机中以10000 r/min离心20分钟。除去上清液;加入正己烷(1:1v/v)并充分混合。将混合物在冷冻离心机中以10000 r/min离心20分钟。通过0.2μm膜滤器过滤并储存在-18℃下用于将来的分析。
1.5总酚类测量
通过Folin-Ciocalteu方法測定总酚含量。将200微升稀释的样品加入1mL 1:10稀释的Folin-Ciocaheu试剂中。摇动混合物并静置6分钟,然后加入800 μL7%Na2CO3溶液。在23℃温育90分钟后,通过酶标仪BioTek ELx808在760nm处读取溶液吸光度。使用没食子酸(0-500mg/L)的溶液制备标准曲线。毫克没食子酸量=(mgAGE·g-1)/g叶干重。
2结论
2.1盐胁迫对植物生长的影响
NaCl浓度的增加对丹参鲜重和干重的影响见表1。在外部NaCl为6 dSm-1时,与对照组相比,根干重减少了41%;枝条干重减少了28%。在外部NaCl盐度5和6 dSm-1时,枝条鲜重分别降低了14.5%和43%。然而,与对照组相比,中等盐度(4 dSm-1)下生长丹参,盐度不显着影响地上部干重。
2.2盐胁迫对总酚含量的影响
与没食子酸标准溶液相比,与Folin-Ciocalteu试剂反应的丹参提取物溶液的吸光度值如图1所示。盐处理显着降低丹参总酚类化合物。在6 dSm-1 NaCl下,总酚含量为3.47 mgAGE g-1 DW,为对照组含量的36.5%,见图1。
3讨论
盐胁迫能够影响丹参全草的干重及鲜重,其中5 dSm-1、6 dSm-1的盐浓度影响较明显,中浓度的盐溶液对枝条和根鲜重和干重的影响不是很大。
盐胁迫能够降低丹参全草中总酚的含量,其中5 dSm-1、6 dSm-1的盐浓度影响较明显,两组分别为对照组的76.5%、36.5%