本文旨在应用响应曲面实验设计优化酶联合挤压豌豆蛋白酶解条件,以期得到最优的抗氧化肽和准确的酶解预测模型,并分离得到具有高自由基清除率的豌豆蛋白抗氧化肽。以含水量为30%的豌豆蛋为原料,以O₂^-.清除率为评价指标,利用响应曲面设计优化中性蛋白酶挤出物的酶解条件,得出酶解最佳条件为:加酶量12.23%、温度40.23℃、pH 6.99、底物浓度6.92%。在此条件下,O₂^-.清除率为75.93%。采用透析和高效液相相结合的方法,对酶解产物进行分离及分子量的确定。分离得到小于1 ku、1³.5 ku、3.5⁷ ku和大于7 ku的酶解液。经测定发现分子量小于1 ku的酶解液抗氧化活性最强,达78.31%,其分子量集中在200⁸00 u左右,为2⁸肽。经验证,所建模型预测准确可靠,酶解产物抗氧化性高,可为相关生产和工艺产品开发提供参考价值。透析可显著提高肽的自由基清除率。