【摘 要】
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目的 探讨泽泻对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响及作用机制.方法 采用MTT法来检测泽泻对RAW264.7细胞的增殖活性的影响.Griess法检测细胞中
【机 构】
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河南中医药大学,河南省仲景方药现代工程研究中心,河南郑州450046;河南中医药大学药学院,河南郑州450046
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目的 探讨泽泻对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响及作用机制.方法 采用MTT法来检测泽泻对RAW264.7细胞的增殖活性的影响.Griess法检测细胞中NO的释放情况.实时定量PCR检测LPS诱导的RAW264.7细胞中环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)等的mRNA表达水平,采用Docking法将泽泻中主要有效成分与TLR1蛋白进行分子对接,检测结合能、结合位点、氢键的形成,采用荧光素酶报告基因检测泽泻对TNF-α诱导NF-κB活化的影响.结果 泽泻在0~100 μg/mL的范围内没有显著的细胞毒性.泽泻能显著降低NO的释放,泽泻能显著下调COX-2、iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子mRNA表达,Docking结果显示泽泻多个主要有效成分能够与TLR1多个位点结合并形成氢键,而对TNF-α诱导NF-κB活化无显著影响.结论 泽泻具有抗炎活性,能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞所发生的炎症反应,可能与抑制TLR1有关,且表现出多成分协同作用的特点.
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