载体构建是分子生物学实验中的重要环节，其构建技术的创新性研发极大地推动分子生物学技木的不断进步。目前使用的载体构建技术有常规的酶切连接法、重叠延伸PCR法、同源重组法等。常规的酶切连接法在多片段的克隆中费时费力，而以Gateway为代表的同源重组法需购置昂贵的试剂。载体的改造主要指定点突变，包括碱基替换、缺失和插入三种类型的修饰。目前有多种方法可用于载体改造，但对于复杂的载体突变和改造，例如多位点突变、无合适酶切位点处的长片段插入等，仍然是很多实验室比较棘手的问题，需要花费较多时间或较高成本。在质粒载体的定点突变中，目前比较常用的方法是使用QuikChange试剂盒(StrataGene公司)，这种方法可直接在质粒上进行氨基酸置换、删除，插入单个或多个氨基酸，并且还可进行多位点突变。但对于较复杂的载体改造，例如包括长片段（几十bp到几百bp）的缺失或（和）插入的多位点突变以及大质粒（大于10kb）上的突变，目前仍然缺少有效的方法。