【摘 要】
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目的 利用微载体-生物反应器技术培养乳仓鼠肾细胞,接种重组痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,建立规模化制备欧洲型PRRSV、PCV2重组痘病毒疫苗的灌注式生产工艺. 方法 利用2L体积灌注
【机 构】
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中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122;中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;吉林大学动物医学学
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目的 利用微载体-生物反应器技术培养乳仓鼠肾细胞,接种重组痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,建立规模化制备欧洲型PRRSV、PCV2重组痘病毒疫苗的灌注式生产工艺. 方法 利用2L体积灌注式生物反应器培养BHK细胞,设定培养参数为温度37℃、溶氧度(DO)为60％,转速为80 r/min,pH值为7.3.当90％微载体表面贴满BHK细胞时以0.1 MOI的感染剂量接种重组痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,设定感染参数为温度35℃、DO为50％、转速为50 r/min,pH值为7.1,继续培养观察. 结果 在采用灌注式生物反应器技术制备重组痘病毒过程中的细胞培养阶段,细胞培养96 h可获得1.587×1010个细胞数,细胞增殖39.67倍;在病毒增殖阶段,微载体上细胞完全脱落时的病毒滴度为2.12×109 PFU/ml. 结论 成功建立了欧洲型PRRSV、PCV2重组痘苗病毒灌注式生产工艺,为规模化制备重组痘病毒疫苗提供了技术参数.
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