重组质粒pcDNA3.1-TK-IRES-BDNF的构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：longxue1211

【摘要】

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目的体外构建携带报告基因胸腺嘧啶核苷激酶（TK）和治疗基因脑源性神经营养因子（BDNF）的重组质粒载体pcDNA3.1-TK-IRES-BDNF,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达。方法

【作者】

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张斌青安锐吴涛孙逊

【机构】

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华中科技大学同济医学院附属协和医院核医学科湖北省分子影像重点实验室

【出处】

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华中科技大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2010年6期

【关键词】

：

骨髓间充质干细胞报告基因基因治疗 bone marrow mesenchymal stem cells reporter gene gene thera

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目的体外构建携带报告基因胸腺嘧啶核苷激酶（TK）和治疗基因脑源性神经营养因子（BDNF）的重组质粒载体pcDNA3.1-TK-IRES-BDNF,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达。方法采用密度梯度离心法分离获得BMSCs,进行细胞免疫化学鉴定;应用PCR技术获得HSV1-TK、内部核糖体进入位点（IRES）、BDNF的cD-NA序列,酶切后依次插入到pcDNA3.1的多克隆位点（MSC）中,酶切和序列分析鉴定;脂质体介导重组质粒pcD-NA3.1-TK-IRES-BDNF转染BMSCs

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