【摘 要】
：
目的:探讨人肾上腺组织单细胞悬液制备的最佳消化方法.方法:收集来自广西医科大学第二附属医院手术终止妊娠的16～18孕周胎儿肾上腺组织3例,分别使用3种消化方案(A方案:HBSS溶液中加入1 mg/mL Ⅰ型胶原酶,0.1mg/mLDN-ase Ⅰ;B方案.:HBSS溶液中加入1 mg/mLⅡ型胶原酶,0.1 mg/mL DNase Ⅰ;C方案:HBSS溶液中加入1m～mLⅣ型胶原酶,0.1 mg/mLDNase Ⅰ)进行消化.采用显微镜计数得到单细胞总数和细胞存活率;通过mRNA测序获得不同消化方案的差异
【机 构】
：
广西医科大学基因组与个体化医学研究中心,南宁530021;广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用协同创新中心,南宁530021;广西医科大学基因组与个体化医学研究中心;广西医科大学第二附属医院,南
论文部分内容阅读
目的:探讨人肾上腺组织单细胞悬液制备的最佳消化方法.方法:收集来自广西医科大学第二附属医院手术终止妊娠的16～18孕周胎儿肾上腺组织3例,分别使用3种消化方案(A方案:HBSS溶液中加入1 mg/mL Ⅰ型胶原酶,0.1mg/mLDN-ase Ⅰ;B方案.:HBSS溶液中加入1 mg/mLⅡ型胶原酶,0.1 mg/mL DNase Ⅰ;C方案:HBSS溶液中加入1m～mLⅣ型胶原酶,0.1 mg/mLDNase Ⅰ)进行消化.采用显微镜计数得到单细胞总数和细胞存活率;通过mRNA测序获得不同消化方案的差异基因表达并对其功能进行分析;使用实时荧光定量PCR检测不同消化方案得到的细胞的标志基因相对表达量;使用流式细胞术检测CYP17A1+类固醇细胞和CHGA+嗜铬细胞的比例.结果:使用A方案和B方案消化得到的单细胞悬液结团少、形态完整、边界清楚、杂质及细胞碎片较少、背景较干净,而使用C方案得到的单细胞悬液有少量结团;使用B方案和C方案消化得到的细胞存活率差异均无统计学意义(均P＞0.05);类固醇细胞标志基因CYP11A1,CYP17A1,CYP11B1,类固醇调控基因SF-1,MC2R和成熟的嗜铬细胞标志基因CHGA的表达水平均在使用B方案消化时较高.结论:使用B方案消化是较优选的单细胞悬液制备方法.
其他文献
目的 探讨个性化3D打印导航模板在膝关节创伤性关节炎全膝关节置换术中的应用效果.方法 回顾性分析自2017-09-2019-09行全膝关节置换术治疗的31例膝关节创伤性关节炎,术前获取患者膝关节CT扫描数据,通过计算机软件模拟标准化手术程序,重建下肢力线,设计股骨远端截骨模板及胫骨平台截骨模板,通过3D打印机制作出患膝实物模型及截骨模板,术中采用个性化3D打印导航模板辅助截骨.结果 31例术后均获得至少2年随访,随访期间膝关节活动度改善,疼痛症状缓解.术后复查X线片显示膝内翻畸形得到矫正,下肢力线恢复正常
目的 探讨钢丝张力带在合并外侧壁损伤股骨粗隆间骨折髓内钉内固定术中的应用方法及效果.方法 回顾性分析自2014-01-2020-05采用股骨近端防旋髓内钉内固定治疗的38例合并外侧壁损伤的股骨粗隆间骨折,介绍钢丝张力带在股骨粗隆间骨折复位、股骨近端外侧壁重建、股骨大粗隆重建时的应用方法.4例置入主钉时出现股骨小粗隆再次移位,5例主钉置入后出现外侧皮质远端张口现象,在置入螺旋刀片后再次尝试复位外侧皮质,发现无法维持外侧壁稳定性,因而决定在股骨近端外侧加用上肢解剖钢板内固定.结果 本组手术时间为50～90 m
目的:观察无创机械通气对慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)合并高碳酸血症患者治疗前后炎症状态及T淋巴细胞亚群的影响.方法:选取2018年3月至2020年2月我院收治的AECOPD合并高碳酸血症患者60例,采用随机数字表法分为两组,每组30例,对照组予以氧疗与常规药物治疗,观察组在对照组基础上予以无创机械通气治疗,比较两组治疗前后炎症状态[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)]、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、血气指标[pH值、动脉
目的 探讨髌上入路髓内钉内固定治疗胫骨骨折的手术操作要点、临床疗效及安全性,为其操作规范和疗效评价提供参考.方法 计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献、Web of Science、PubMed等数据库收录的关于髌上入路髓内钉内固定治疗胫骨骨折的相关文献,并进行整理分析.结果 纳入51篇文献,共1893例.31篇文献报道术中膝关节屈曲度为15°～30°,39篇文献报道于髌骨上极2 cm处作长3 cm纵形切口.27篇文献报道进针位置在正位透视下胫骨外侧棘突内侧缘,侧位透视下前侧皮质与胫骨平台边缘
目的:探讨广西防城港市男性人群血浆循环免疫标志物与心电图参数的横断面关系.方法:根据广西防城港市男性健康体检调查(FAMHES)资料,测定了血浆中总白细胞计数及其亚群、血小板(PLT)计数、心电图参数.采用LASSO(最小绝对收缩和选择算子)惩罚回归模型,选择可能与心电图参数独立相关的循环炎症标志物.采用多元线性回归分析确定其暴露—反应关系.结果:本研究共纳入1261例男性受试者.调整协变量后,每1×109/L的中性粒细胞计数和血小板计数的增加分别与1.611 bpm和0.023 bpm的心率增加有关,每
目的 探讨负重压力监测智能鞋系统在AO-B型胫骨干骨折交锁髓内钉内固定术后康复训练中的应用效果.方法 纳入自2019-01-2020-10采用交锁髓内钉内固定治疗的32例AO-B型胫骨干骨折,观察组术后使用负重压力监测智能鞋系统监测、指导康复训练,对照组进行常规经验性康复训练.比较两组术后静息状态下疼痛VAS评分、骨折临床愈合时间、Johner-Wruhs评分.结果 32例均获得至少6个月随访.观察组与对照组术后1周、6个月静息状态下疼痛VAS评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).观察组术后1个月、3
目的 探讨初次人工髋关节置换术后假体周围感染的危险因素及翻修手术疗效.方法 纳入自2018-01-2020-01完成的180例人工髋关节置换术,术后18例出现假体周围感染,采用多因素Logistic回归分析术后假体周围感染的危险因素.比较翻修手术前后血沉、C-反应蛋白、降钙素原、髋关节功能Harris评分、疼痛VAS评分、SF-36量表评分.结果 单因素分析结果显示,感染组和未感染组在体质量指数、合并糖尿病患者比例、髋关节置换原因、假体类型、手术时间、术中出血量方面差异有统计学意义(P＜0.05).多因素
目的 观察关节镜手术联合膝关节矫形支具和外侧楔形鞋垫治疗膝内侧骨性关节炎的临床疗效.方法 纳入自2018-07-2020-03诊治的40例膝内侧单间室骨性关节炎,观察组20例采用膝关节镜手术联合矫形支具、外侧楔形鞋垫治疗,对照组20例单纯进行膝关节镜手术治疗.比较观察组与对照组术后膝关节疼痛VAS评分与膝关节功能Lysholm评分,以及手术前后固有偏距差值的绝对值.比较合并盘状半月板患者与未合并盘状半月板患者手术前后固有偏距差值的绝对值.结果 40例术后均获得12个月随访.观察组术后1、3、12个月膝关节
目的 探讨尺骨斜行短缩截骨术治疗尺骨撞击综合征的临床疗效与术中操作体会.方法 回顾性分析自2012-03-2018-05诊治的17例(23腕)尺骨撞击综合征,行尺骨斜行短缩截骨术,矫正尺骨正向变异,垂直截骨面予以拉力螺钉加压固定,辅以3.5 mm重建接骨板固定截骨端.术后采用疼痛VAS评分评价腕关节疼痛缓解情况,采用改良Mayo评分评价腕关节功能恢复情况.结果 17例均获得随访,随访时间9～22个月,中位时间12个月.截骨端均愈合,愈合时间10～19周,中位时间13周.末次随访时所有患者症状明显改善,疼痛
目的 检测不同病程膝关节骨性关节炎患者血液与滑膜液中白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)含量,探讨其与活化T细胞核转录因子(Nuclear factor of activatedT cell 1,NFAT1)表达水平在此类患者疾病进展中是否存在关联.方法 选取自2017-05-2018-12住院治疗的56例膝关节骨性关节炎,轻度组8例,中度组31例,重度组17例.检测患者血液和滑膜组织中IL-6含量及NFAT1的mRNA表达水平,采用双荧光素酶报告基因验证NFAT1与IL-6启动子的相互