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以黑龙江省分离的牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株基因组DNA为模板，参考GenBank发表的羊腐蹄病坏死杆菌A25菌株白细胞毒素基因核苷酸序列，设计5对覆盖白细胞毒素基因完整开放阅读框（ORF）的引物，通过PCR扩增获得了H05菌株白细胞毒素基因5个相互重叠的DNA片段，将它们克隆到pMD18-T载体中。测序结果显示：牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株白细胞毒素基因长为9723bp，编码一个3240个氨基酸的蛋白质，与羊腐蹄病坏死杆菌白细胞毒素蛋白的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.75%和99.63%，缺失了1078