【摘 要】
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为探讨miRNA let-7b介导IGF2BP3调控鸡成肌细胞增殖的作用机制,研究利用let-7b过表达载体转染鸡成肌细胞,通过双荧光素酶报告系统、MTT、q PCR、Western blot和ELISA进行功能
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目(2016A030313377)
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为探讨miRNA let-7b介导IGF2BP3调控鸡成肌细胞增殖的作用机制,研究利用let-7b过表达载体转染鸡成肌细胞,通过双荧光素酶报告系统、MTT、q PCR、Western blot和ELISA进行功能验证。结果表明:(1)采用双荧光素酶报告系统和突变试验证明let-7b靶向作用于IGF2BP3的3′UTR。(2)let-7b在成肌细胞中过表达后,细胞增殖受到一定程度的影响,与空质粒组相比,细胞数量呈现下降趋势。(3)let-7b可使靶基因IGF2BP3 mRNA表达量下调2.33倍,差异显著(P<0.05),对IGF2、IGF1 mRNA表达量的影响差异不显著(P>0.05)。综合分析,miRNA let-7b主要通过靶向调控IGF2BP3 mRNA和蛋白质表达水平,从而影响鸡成肌细胞的增殖。
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