乙型肝炎病毒前S2基因克隆及真核表达载体的构建

来源 :微循环学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongguoboy
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目的:克隆乙型肝炎病毒前S2基因,构建其真核表达质粒。方法:以乙型肝炎患者血清HBV DNA为模板,设计引物扩增全长前S2基因,再将目的基因插入到真核载体pcDNA3.1(+)中,经PCR、酶切和DNA测序确认。结果:从患者血清抽提的DNA中扩增得到约860bp大小的目的片段,经回收、纯化、酶切后转化大肠杆菌DH5α,阳性重组质粒经PCR扩增得到约860bp产物;重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切得到5.4kb和860bp两个片段,与预期一致;经DNA测序与已知序列比对确认前S2基因片段正确插入pcD
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