【摘 要】
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目的:探讨桉树脑(Cin)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)水通道蛋白(AQP)3及透明质酸(HA)转录和翻译的影响.方法:以倍他米松(BT)为对照,不同浓度Cin(0.01％、0.001％、0.0001％和0.000
【机 构】
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广州医科大学皮肤病研究所、广州市皮肤病防治所皮肤科,广东广州510095
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目的:探讨桉树脑(Cin)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)水通道蛋白(AQP)3及透明质酸(HA)转录和翻译的影响.方法:以倍他米松(BT)为对照,不同浓度Cin(0.01％、0.001％、0.0001％和0.00001％)分别孵育HaCaT细胞36 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)检测AQP3 mRNA表达水平,免疫印迹法(western blot)分析AQP3蛋白表达,以及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞外基质中HA的含量.结果:与空白对照组相比,qPCR结果示0.01％和0.001％Cin均显著增加了AQP3基因的转录(P＜0.05);而10 μmol/L BT明显下调AQP3基因转录(P＜0.05);0.01％和0.001％Cin 分别与10 μmol/L BT共同孵育HaCaT细胞后,均可逆转10 μmol/L BT引起的AQP3 mRNA表达下调(P＜0.05).Western blot结果表明,与空白对照组比较,0.01％Cin组和0.001％Cin组AQP3蛋白表达均显著增加(P＜0.05);10 μmol/L BT组AQP3蛋白表达明显下调(P＜0.05).与空白对照组比较,0.01％Cin+10μmol/L BT 组和0.001％Cin+10μmol/L BT 组AQP3蛋白表达均下降(P＜0.05);与10 μmol/L BT组比较,AQP3蛋白表达均明显提高(P＜0.05).ELISA结果表明,与空白对照组比较,10 μmol/L BT组HA表达水平下调(P＜0.05);与10 μmolL BT 组比较,0.01％Cin+10 μmol/L BT组和0.001％Cin+10 μmolL BT组HA 表达水平均上调(P＜0.05),但均低于空白对照组(P＜0.05).结论:Cin可不同程度逆转BT对角质形成细胞AQP3和HA的抑制作用.
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