重组人促红细胞生成素中试纯化工艺研究

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采用堆积床生物反应器,用无血清培养基培养分泌rhEPO的工程细胞株XP9501.所收集的上清液,经过快速离子交换层析-反相-分子筛层析纯化后,所得EPO纯度达99%以上,比活性为1.5×105IU/mg.整个纯化全过程的EPO体内活性回收率为46%.所纯化的EP0分子量为36kd,等电点为3.5.免疫印迹证明其有天然EPO的免疫原性,N端15个氨基酸序列分析与文献报道一致.本纯化工艺路线简单,时程短,重复性好,适合于大规模生产重组人促红细胞生成素.
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