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目的：产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一，该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素，其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、酶的纯化及活性验证。方法：利用PCR技术，以大肠杆菌全基因组为模板钓取TEM-1基因，构建pET22b（＋）-TEM-1表达质粒，经测序鉴定后，转入大肠杆菌Transetta（DE3），IPTG诱导表达、亲和纯化，并通过抗生素水解实验验证其酶活性。结论：构建了可溶性表达TEM-1的