【摘 要】
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目的 评价两种去抗原异种骨支架脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM)和煅烧骨的理化性能、免疫原性及成骨能力.方法 取成年猪股骨,通过除去异种骨无机成分和有机成分的方式,分别制备异种DBM和煅烧骨.测量并计算两种材料的密度、pH值,扫描电镜观察材料形貌并测量孔径,全自动接触角测量仪测量材料的表面接触角;并通过细胞毒性实验、成骨细胞增殖实验、DNA残留检测和人外周血淋巴细胞增殖实验评价两种材料的安全性、成骨活性及免疫原性.将两种材料分别植入6周龄雄性SD大鼠颅骨直径5 mm全层缺
【机 构】
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首都医科大学附属北京同仁医院骨科 北京100730;上海亘从生物医用材料研究中心 上海201201;上海亚朋生物技术有限公司 上海201201;上海亚朋生物技术有限公司 上海201201
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目的 评价两种去抗原异种骨支架脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM)和煅烧骨的理化性能、免疫原性及成骨能力.方法 取成年猪股骨,通过除去异种骨无机成分和有机成分的方式,分别制备异种DBM和煅烧骨.测量并计算两种材料的密度、pH值,扫描电镜观察材料形貌并测量孔径,全自动接触角测量仪测量材料的表面接触角;并通过细胞毒性实验、成骨细胞增殖实验、DNA残留检测和人外周血淋巴细胞增殖实验评价两种材料的安全性、成骨活性及免疫原性.将两种材料分别植入6周龄雄性SD大鼠颅骨直径5 mm全层缺损(空白对照组不植入材料),术后4、8周取材,通过大体观察、Micro-CT扫描和HE染色观察评价材料对大鼠颅骨的修复效果.结果 与煅烧骨比较,DBM密度较小,亲水性较差;两种材料pH值在5.5～6.1之间,孔径介于160～800 μm之间.两种材料均无细胞毒性且能够促进成骨细胞增殖,培养1、4、7d成骨细胞增殖吸光度(A)值DBM组均显著大于煅烧骨组(P＜0.05).两种材料DNA残留量远低于50 ng/mg干重,且均不会刺激人外周血淋巴细胞增殖和分化.动物体内实验结果显示,术后4周DBM组和煅烧骨组新生骨体积百分比(bone volume/total volume,BV/TV)均显著高于空白对照组,煅烧骨组显著高于DBM组,差异均有统计学意义(P＜0.05);术后8周,3组间BV/TV差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色示,术后4、8周,空白对照组缺损部位被纤维结缔组织填充,缺损明显,未见骨长入;DBM组和煅烧骨组缺损均已被不同程度修复,可见大量新骨生成,DBM组材料降解性优于煅烧骨组.结论 两种异种骨支架理化性能及降解性略有差异,无免疫原性,且均能促进大鼠颅骨缺损的修复.
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