甲醛交联法研究高温条件下大肠杆菌体内小分子热休克蛋白IbpB的客户蛋白

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yyyyoooouuuu

【摘要】

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目的：研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法构建表达IbpB蛋白的重组质粒pBAD－ibpB，pBAD质粒为对照，转化到BW

【作者】

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石小东胡蕊胡秋梅

【机构】

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徐州医学院麻醉学重点实验室

【出处】

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徐州医学院学报

【发表日期】

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2015年12期

【关键词】

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小分子热休克蛋白 IbpB 客户蛋白甲醛交联 small heat shock protein IbpB client protein formaldehyd

【基金项目】

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江苏省自然科学基金青年基金（BK20130232）

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目的：研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法构建表达IbpB蛋白的重组质粒pBAD－ibpB，pBAD质粒为对照，转化到BW25113－ΔibpB菌株。转化pBAD－ibpB质粒的BW25113－ΔibpB菌株在45℃热处理之后加入甲醛进行交联，亲和层析法对交联产物进行纯化，质谱法对捕获的客户蛋白进行鉴定，过氧化氢酶活性测定和蛋白热聚集体分离的方法检测IbpB对其客户蛋白的作用。结果质谱鉴定结果表明IbpB在高温条件下互相作用的客户蛋白

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