【摘 要】
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目的 探讨川蛭通络胶囊对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用ICR小鼠中动脉阻断(MCAO)制备小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将ICR小鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO/R组、川蛭通络胶囊治疗组(CZTLC),每组15只.其中CZTLC组于手术前5 d,口服灌胃给药2次/d.缺血60 min、再灌注24 h对小鼠进行神经行为学评分,深度麻醉取小鼠脑组织进行病理学TTC、HE及甲苯胺蓝染色;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)测试盒分别测定脑组织SOD及MDA含量;ELISA检
【机 构】
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450000 郑州市,河南中医药大学第一附属医院脑病一区;山东省济南市第三人民医院神经内二科;河北省邢台市第三医院神经内科
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目的 探讨川蛭通络胶囊对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用ICR小鼠中动脉阻断(MCAO)制备小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将ICR小鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO/R组、川蛭通络胶囊治疗组(CZTLC),每组15只.其中CZTLC组于手术前5 d,口服灌胃给药2次/d.缺血60 min、再灌注24 h对小鼠进行神经行为学评分,深度麻醉取小鼠脑组织进行病理学TTC、HE及甲苯胺蓝染色;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)测试盒分别测定脑组织SOD及MDA含量;ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-4及IL-10的表达变化;RT-PCR、Western Blot检测Bax、Bcl-2、Caspase-3基因及蛋白水平表达.结果 HE染色、尼氏染色显示,与假手术组相比,MCAO/R可明显诱导左侧皮层和海马CA1区神经元损伤(P>0.05).模型组大鼠脑组织损伤侧主要表现神经元细胞体积缩小,胞浆空泡变性,细胞间排列疏松,海马、皮质的神经元大部分萎缩;细胞内尼氏小体数量减少,染色变浅.与模型组比较,观察到川蛭通络胶囊治疗组小鼠脑组织区域神经元细胞损伤较轻微,表现为神经细胞的紧密排列和细胞内尼氏小体数量增加.同时,与假手术组相比,药物处理组海马CA1和皮层的正常神经元数量显著减少.假手术组小鼠脑组织SOD活性明显高于模型组,MDA水平明显低于模型组(P>0.05);与模型组相比,川蛭通络胶囊组小鼠脑组织中SOD活性显著升高,MDA水平显著降低(P>0.05).模型组小鼠脑匀浆TNF-α、IL-1β及IL-6含量较假手术组明显升高,而IL-10含量明显降低(P<0.05).CZTLC干预组小鼠脑匀浆TNF-α、IL-1β 及IL-6含量较模型组明显降低,而IL-10含量明显升高(P<0.05).CZTLC可显著下调凋亡蛋白caspase-3及Bax在基因水平及蛋白水平的表达,同时其亦明显上调Bcl-2的表达,与CAMO/R组进行对比差异有统计学意义(P<0.05).结论 CZTLC在小鼠脑缺血再灌注损伤中具有明确的保护作用,其机制与改善炎性反应及抑制细胞凋亡有关.
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