【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-146a(miR-146a)经Toll样受体4(TLR4)/髓系分化因子88蛋白(MyD88)途径调控巨噬细胞迁移所致动脉硬化的具体机制.方法 RAW264.7巨噬细胞分为空白组、ox-LDL组、miR-146a mimic组、miR-146a inhibitor 组、shRNA-MyD88组、shRNA-NC 组、shRNA-MyD88+miR-146a mimic 组、shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组,除空白组,其他各组均用50 mg/L ox-LD
【机 构】
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沈阳医学院附属中心医院心血管内科,辽宁沈阳110024
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目的 探讨微小RNA-146a(miR-146a)经Toll样受体4(TLR4)/髓系分化因子88蛋白(MyD88)途径调控巨噬细胞迁移所致动脉硬化的具体机制.方法 RAW264.7巨噬细胞分为空白组、ox-LDL组、miR-146a mimic组、miR-146a inhibitor 组、shRNA-MyD88组、shRNA-NC 组、shRNA-MyD88+miR-146a mimic 组、shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组,除空白组,其他各组均用50 mg/L ox-LDL进行干预;采用Western blotting法检测TLR4、MyD88、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平.采用qPCR法检测miR-146a、TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6基因表达水平.采用Transwell法检测巨噬细胞迁移能力.结果 ①ox-LDL组细胞内TLR4、IL-6蛋白含量及巨噬细胞迁移率均高于空白组(P均＜0.01),miR-146a低于空白组(P＜0.01);②miR-146a mimic组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL组,miR-146a mRNA相对表达量高于ox-LDL组(P均＜0.01);miR-146a inhibitor组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率高于ox-LDL组,miR-146a mRNA 相对表达量低于ox-LDL 组(P均＜0.01);③shRNA-MyD88组 MyD88、NF-KB、IL-6蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL 组(P＜0.01),miR-146a、TLR4表达无明显差异(P＞0.05);shRNA-MyD88+miR-146a mimic 组 miR-146a 表达高于 shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量低于 shRNA-MyD88组(P＜0.01),MyD88、NF-KB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P＞0.05);shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组 miR-146a 表达低于 shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量表达高于 shRNA-MyD88组(P＜0.01),MyD88、NF-KB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P＞0.05).结论 miR-146a是动脉粥样硬化的保护性因子,通过拮抗TLR4/MyD88途径调控炎症因子分泌进而抑制巨噬细胞迁移所致动脉粥样硬化进程,为动脉粥样硬化的防治提供新的治疗靶点.
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