【摘 要】
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目的 了解IFN β-1a抑制肝星状细胞活化新的作用分子,并进一步验证该分子与HSC活化和肝纤维化的关系.方法 LX-2细胞经2000 U/ml IFN β-1a处理48 h后,采用二维电泳技术对IFN
【机 构】
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北京大学人民医院、北京大学肝病研究所
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目的 了解IFN β-1a抑制肝星状细胞活化新的作用分子,并进一步验证该分子与HSC活化和肝纤维化的关系.方法 LX-2细胞经2000 U/ml IFN β-1a处理48 h后,采用二维电泳技术对IFN β-1a处理和未处理的LX-2细胞蛋白质进行分离,质谱鉴定IFN β-1a处理前后LX 2细胞中差异表达超过2倍的蛋白点.对于鉴定出的差异表达分子,通过Western blot和RT-PCR方法验证其在LX-2细胞中、肝组织中以及肺、脑、脾、肾、心组织中的表达情况.结果 与对照组相比,IFN-β-1a处理组LX-2细胞中有31个差异蛋白点,其中1个特异表达、5个上调表达、25个下调表达.其中特异表达的蛋白经鉴定为神经胶质成熟因子β(GMF β);表达上调的5个点鉴定出2种蛋白,为组蛋白H2A和β-原肌球蛋白;表达下调的25个点鉴定出18种蛋白.进一步对GMF β的表达情况进行验证发现,与对照组相比,经IFN β-1a作用后的LX-2的GMF β蛋白表达明显(t=1.81,P＜0.01);大鼠正常肝组织中GMF β的蛋白和mRNA相对表达量明显高于肝硬化肝组织(蛋白相对表达量为1.81对比0.10,mRNA相对表达量为0.85对比0.12,t值分别为2.53,2.13,P＜0.01);GMF β的蛋白和mRNA在大鼠的脑、脾、肝、肾组织中明显表达,而肺、心组织中无表达(t值分别为1.91、1.94,P＜0.01).结论 IFN β-1a处理后的LX-2的蛋白质表达存在差异,这些差异表达的蛋白质可能参与了IFN β-1a对HSC活化的抑制以及HSC的凋亡.IFN β-1a处理后的LX-2以及正常大鼠的肝组织中GMF β有明显的表达,GMF β可能抑制HSC的活化以及抑制肝纤维化的进展.
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