【摘 要】
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目的探讨胶原-壳聚糖膜(collagen-chitosan tissue engineering membrane,CCM)在体外对鼓膜上皮层角朊细胞(keratinocyte,KC)、纤维层成纤维细胞(fibroblast,FB)生长、增殖以
【机 构】
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海军总医院全军耳鼻咽喉科中心,吉林省人民医院耳鼻咽喉科
【基金项目】
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中国博士后科学基金项目(20070420565)
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目的探讨胶原-壳聚糖膜(collagen-chitosan tissue engineering membrane,CCM)在体外对鼓膜上皮层角朊细胞(keratinocyte,KC)、纤维层成纤维细胞(fibroblast,FB)生长、增殖以及胶原分泌功能的影响。方法热干法制备CCM,传代的大鼠鼓膜上皮KC和FB分别接种于培养板及CCM表面,通过角蛋白、细胞膜波形蛋白免疫荧光染色鉴定细胞特异性,通过细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫荧光染色测定膜上细胞的增殖能力,通过细胞培养液上清的羟脯氨酸测定评价对FB胶原分泌功能的影响。结果传代的大鼠鼓膜上皮KC和FB在CCM上生长,细胞形态及角蛋白、细胞膜波形蛋白免疫荧光染色阳性结果均未见明显改变。分别在培养板及CCM上接种6天的KC和FBPCNA染色荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。在培养板和CCM上接种6天的FB培养液上清中胶原含量分别为(11.26±0.68)×10-2和(12.02±0.8)×10-2(单位为每微克蛋白含胶元的微克量),差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外实验证实热干法制备的CCM适合鼓膜KC和FB生长、增殖,FB可以保持良好的胶原分泌功能。
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