BCSC-1基因慢病毒干扰载体的构建与鉴定

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目的构建BCSC-1基因慢病毒RNA干扰载体并感染人乳腺癌细胞MCF-7,实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰效果。方法设计并合成两条针对人BCSC-1基因的干扰序列(BCSC-1 shRNAI和BCSC-1shRNA2)以及对照序列(NS),将其连接入载体PLKO.1-sp6-pgk-GFP中,得到两个干扰载体和一个阴性对照载体。通过菌落PCR、双酶切和DNA序列测定等方法对其进行鉴定。将干扰载体与辅助包装质粒Lipo-fectamine2000共转染HEK293T细胞包装慢病毒并收取病毒上清。所获慢
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