【摘 要】
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牛干扰素可用于对各种类型牛传染性疾病的预防和治疗.利用家蚕杆状病毒表达系统表达牛α干扰素(BoIFN-α)及牛λ1干扰素(BoIFN-λ1).首先对BoIFN-α和BoIFN-λ1的编码基因序
【机 构】
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江苏科技大学,江苏镇江212003;中国农业科学院生物技术研究所,北京100081;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;江苏科技大学,江苏镇江,212003
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牛干扰素可用于对各种类型牛传染性疾病的预防和治疗.利用家蚕杆状病毒表达系统表达牛α干扰素(BoIFN-α)及牛λ1干扰素(BoIFN-λ1).首先对BoIFN-α和BoIFN-λ1的编码基因序列进行优化合成,优化合成的BoIFN-α和BoIFN-λ1基因的密码子适应指数(CAI)值提高,更适合在家蚕中表达,且翻译后的氨基酸序列与原始氨基酸序列完全一致.将优化合成的2个基因序列分别克隆至杆状病毒转移载体pVL1393,与缺失了orf1629的亲本杆状病毒BmBacmid共转染BmN细胞,通过同源重组将BoIFN-α和BoIFN-λ1基因插入到杆状病毒多角体蛋白基因启动子下游,获得重组病毒rBmBac-BoIFN-α和rB-mBac-BoIFN-λ1.用纯化的重组病毒感染家蚕5龄幼虫融合表达BoIFN-α和BoIFN-λ1干扰素,并通过PCR鉴定了2个目标蛋白基因在蚕体内的复制.采用微量细胞病变抑制法在Vero/VSV* GFP表达系统检测蚕体中表达重组BoIFN-α的效价可达1.0× 106 U/mL左右,重组BoIFN-λ1的效价可达5.01×104 U/mL左右.试验结果提示,利用家蚕杆状病毒表达系统在蚕体内表达牛α干扰素及牛λ1干扰素是生产牛干扰素制剂更加廉价而高效的途径.
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