恶性疟原虫FCC-1/HN株环子孢子蛋白基因片段的亚克隆及表达

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:syzy3106jiege
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目的 构建恶性疟原虫FCC-1/HN株CSP基因的重组真核表达质粒pBK-CSP,在大肠杆菌中进行表达,并进行鉴定。方法 采用限制性内切酶法从重组的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pBCG5 6/CSP中分离出经过测序鉴定的CSP基因片段,将其亚克隆于pBK CMV真核表达载体,构建重组真核表达质粒pBK-CSP。经IPTG诱导,重组质粒在大肠杆菌DH5α中进行表达,并进行SDSPAGE及免疫印迹分析。结果 从pBCG5.6/CSP中分离出CSP基因片段,成功构建pBK-CSP重组质粒;SDS-PAGE及免疫印迹分析结果 显示特异性蛋白条带的相对分子质量约为42000。结论 从pBCG 5.6/CSP中成功分离出CSP基因片段,并成功构建pBK-CSP重组质粒,诱导表达CSP非融合蛋白.为恶性疟原虫DNA疫苗的研制奠定了基础。

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