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目的 对黑龙江省部分地区的虫媒病毒进行调查,从吸血蚊虫中分离病毒,并对其进行鉴定.方法2002年在黑龙江省采集蚊虫标本,用BHK细胞分离病毒,并进行血清学和分子生物学鉴定.应用Clustal X(1.8)软件做碱基配对及进化分析,GENEDOS(3.2)软件完成氨基酸位点分析.结果4株病毒引起BHK细胞规律病变,病变时间为72 h,乳鼠脑内接种病毒后72 h死亡.与标准乙型脑炎病毒抗体呈阳性反应.扩增病毒PrM、E区段并进行基因分型分析,4株病毒属于基因Ⅲ型乙型脑炎病毒.以减毒活疫苗株SA14-14-2为标准,采用以往黑龙江省分离的乙脑毒株(47、Ha-3株)为参照对4株病毒的E基因区段进行分析,4株病毒之间核苷酸同源性在99.9%以上,氨基酸同源性在99.8%以上;新分离4株乙脑病毒与SA14-14-2的核苷酸同源性为97.3%,氨基酸同源性在96.8%～97.0%,共存在7个位点的共同差异.结论在黑龙江省新分离到4株乙型脑炎病毒.在决定病毒毒力的8个重要位点上有6处差异。