【摘 要】
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目的:观察小柴胡汤加味对慢性束缚抑郁模型大鼠海马谷氨酸膜转运体(EAATs)及囊泡转运体(VGLUTs)表达的影响,探讨小柴胡汤加味基于谷氨酸转运的抗抑郁机制.方法:120只SD大鼠随
【机 构】
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河南中医药大学 中医药科学院,郑州450046;河南省仲景方药现代研究重点实验室,郑州450046;河南中医药大学 基础医学院,郑州450046;河南中医药大学第一临床医学院,郑州450006
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目的:观察小柴胡汤加味对慢性束缚抑郁模型大鼠海马谷氨酸膜转运体(EAATs)及囊泡转运体(VGLUTs)表达的影响,探讨小柴胡汤加味基于谷氨酸转运的抗抑郁机制.方法:120只SD大鼠随机分为正常组、模型组、小柴胡汤加味组低、中、高剂量组、利鲁唑组,每组20只.除正常组外,其余各组采用束缚应激制备大鼠抑郁模型,小柴胡汤加味低、中、高剂量组分别灌胃(ig)小柴胡汤加味6.5,13,26 g·kg-1;利鲁唑组腹腔注射利鲁唑20 mg· kg-1;正常组和模型组i等量生理盐水;1次/d,共干预21d.采用强迫游泳实验(FST)和悬尾实验(TST)评价大鼠的抑郁行为;采用高效液相色谱法(HPLC)检测海马组织中谷氨酸含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马中EAAT1,EAAT2和EAAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织EAAT1,EAAT2,EAAT3,VGLUT1,VGLUT2蛋白表达;用尼氏染色法观察大鼠海马神经元形态,免疫组化(IHC)检测海马CA1区EAAT1,EAAT2和NeuN蛋白在神经细胞中的定位表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠悬尾和强迫游泳不动时间均显著延长(P＜0.01),海马内EAAT1,EAAT2,EAAT3 mRNA和蛋白表达均显著下降(P＜0.01),VGLUT1和NeuN蛋白表达均显著降低(P＜0.01);而谷氨酸水平和VGLUT2表达均显著增高(P＜0.01).与模型组比较,小柴胡汤加味中、高剂量组大鼠悬尾和强迫游泳不动时间明显缩短(P＜0.05,P＜0.01),海马内EAAT1,EAAT2和EAAT3mRNA和蛋白表达量均显著增加(P＜0.01),VGLUT1和NeuN蛋白表达均显著增强(P＜0.01),谷氨酸水平和VGLUT2表达显著回降(P＜0.01),海马神经元结构明显复原.结论:小柴胡汤加味有明显的抗抑郁作用,其机制可能与其上调大鼠海马内EAAT1,EAAT2,EAAT3基因和VGLUT1蛋白表达.
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