不同启动子表达载体的构建及其体外活性分析

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duancj1972
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本研究以禽网状内皮增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)囊膜糖蛋白(envelope,env)基因作为报告基因,定量检测不同启动子在体外的转录活性,为研发马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)活载体疫苗、选择适宜的启动子提供依据。本试验构建6个含不同启动子,且能表达env基因的重组质粒,并将构建好的重组质粒转染到鸡胚成纤维细胞中,通过间接免疫荧光试验和实时荧光定量PCR检测不同启动子的表达转录水平。研究证明6种启动子均能使env基因在体外获得表达,且不同启动子的转录活性不同。比较发现MDV自身启动子相对其他组启动子的转录活性较弱,pec启动子的转录活性最强。
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