微小RNA-98靶向N-Ras调控涎腺腺样囊性癌侵袭和迁移

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目的

观察微小RNA(miRNA,miR)-98对涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。

方法

运用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-98在SACC新鲜组织及细胞株中的表达。利用生物信息软件预测出miR-98的靶基因为N-Ras。免疫组织化学法检测N-Ras在SACC组织标本中的表达并分析其临床意义。上调/下调SACC细胞株miR-98的表达后,应用噻唑盐(MTT)法、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验检测miR-98对SACC细胞增殖、迁移及侵袭影响。并采用双荧光素酶报告基因系统、RT-qPCR和Western blot检测miR-98与N-Ras的靶向关系。

结果

miR-98在SACC组织中及ACC-M细胞中呈低表达,N-Ras在SACC组织中呈高表达,其表达与肿瘤T分期和临床分期相关。转染miR-98 mimics后,ACC-M细胞的增殖能力降低,发生侵袭的细胞数由(158.0±5.5)个减少至(92.0±4.7)个(t=15.800,P=0.000),细胞24 h迁移距离由(0.42±6.30) mm减少至(0.25±6.00) mm(t=4.630,P=0.001);而当miR-98被抑制后,SACC-83细胞的增殖能力增强,发生侵袭的细胞数[(123.0±10.6)]个比对照组[(88.0±4.0)个]增多(t=5.254,P=0.006),细胞24 h迁移距离由(0.15±7.50) mm增加(0.38±8.80) mm(t=9.109,P=0.000)。此外双荧光素酶报告基因系统、RT-qPCR和Western blot均证实miR-98能够调控N-Ras的表达。

结论

miR-98可以作用于N-Ras,进一步调控SACC细胞的侵袭和迁移能力。

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