目的构建C35的小干扰RNA(siRNA),观察其在乳腺癌细胞株T47D中对C35基因的表达抑制作用。方法设计两对针对C35编码区的siRNA并合成,构建到转录载体pTZU6+1上,形成重组质粒siRNA-C35,在脂质体介导下转染乳腺癌细胞株T47D,RT-PCR分析RNA干扰后mRNA的变化,Western blot检测表达蛋白的变化。结果DNA测序和双酶切证明重组表达载体构建成功。RT-PCR结果显示,质粒pTZU6+1、pshRNA-C35-1和pshRNA-C35-2组的相对表达率分别是脂质体对照组的95.3%、40.0%和28.4%。Western blot结果显示,以转染脂质体组的蛋白带为标准,其他组与之比较,转染质粒pTZU6+1、psiRNA-C35-1和psiRNA-C35-2组的相对表达率分别是转染对照组(脂质体组)的94.9%、29.6%和32.2%。结论通过构建siRNA转录载体转染乳腺癌细胞株能有效抑制乳腺癌细胞中C35基因的表达。