目的 探讨富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞增殖、分化及细胞骨架的影响,以期为富血小板纤维蛋白在临床的应用提供理论基础.方法 实验组使用含PRFe的α-最低必需培养基(α-minimum essential medium,α-MEM)培养液(10％胎牛血清)培养细胞,对照组使用不含PRFe的α-MEM培养液(10％胎牛血清).甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测培养1、3、5d细胞增殖的A值；以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测1、3、5、7d的细胞分化情况；茜素红染色观察14、21 d细胞分泌钙结节的情况；激光共聚焦显微镜观察培养后3、6、9及12 h的细胞骨架形态；荧光实时定量PCR检测核心结合因子α1(core-binding factor α1,Cbfα1)和骨钙蛋白基因分别在培养3、7d的表达.结果 MTT检测结果显示,随培养时间延长,细胞数量逐渐增加,在培养1、3、5d实验组细胞A值(分别为0.336±0.011、0.571±0.039、0.787±0.050)均显著高于对照组(分别为0.300±0.021、0.387±0.040、0.527±0.034) (P ＜0.05).两组ALP活性均随培养时间延长而增加,实验组的增加更为显著,在培养1、3、5、7d实验组A值(分别为0.146 ±0.014、0.199±0.017、0.390±0.020及0.492 ±0.019)均显著大于对照组(分别为0.115±0.014、0.145±0.015、0.190 ±0.015及0.230±0.026)(P＜0.05).茜素红染色结果显示,两组随培养时间延长细胞分泌的钙结节均逐渐增多,培养14、21 d实验组细胞分泌的钙结节积分吸光度值(分别为22.119±3.694、31.528±3.162)均较对照组(分别为8.498±2.041、15.162 ±2.526)显著增加(P＜0.05).在各时间点,实验组细胞骨架均较对照组更加伸展；两组细胞的基因表达量也随时问逐渐增加,实验组细胞Cbfα1和骨钙蛋白基因表达量均显著高于对照组(P＜0.05).结论 PRFe能有效促进成骨细胞的增殖和分化,并对细胞骨架早期的排列和伸展有明显的促进作用。
富血小板纤维蛋白提取液对MC3T3-E1细胞影响的实验研究
【摘 要】
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目的 探讨富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞增殖、分化及细胞骨架的影响,以期为富血小板纤维蛋白在临床的应用提供理论基础.方法 实验组使用含PRFe的α-最低必需培养基(α-minimum essential medium,α-MEM)培养液(10％胎牛血清)培养细胞,对照组使用不含PRFe的α-MEM培养液(10％胎牛血清).甲基
【机 构】
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【出 处】
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中华口腔医学杂志
【发表日期】
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2013年48期
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