【摘 要】
：
E.coli热诱导赖氨酰-tRNA合成酶(LysU,EC 6.1.1.6)是高效的Ap4A/Ap3A合成酶,已知反应模式为双重动态过程:2ATP→Ap4A+2Pi→Ap3A+3Pi。为进一步研究LysU"中间物可逆"催化模型,
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目(81273465)~~
论文部分内容阅读
E.coli热诱导赖氨酰-tRNA合成酶(LysU,EC 6.1.1.6)是高效的Ap4A/Ap3A合成酶,已知反应模式为双重动态过程:2ATP→Ap4A+2Pi→Ap3A+3Pi。为进一步研究LysU"中间物可逆"催化模型,表达纯化了LysU蛋白并验证结构稳定性,构建了二腺苷多磷酸产物检测系统并分离了各阶段催化产物,观察了AMPPCP和AMPCPP阻断Ap3A/ADP合成的反应。圆二色光谱和荧光光谱扫描证明纯化后的LysU蛋白结构完整。LysU首先催化ATP合成83%的Ap4A,接着可逆生成67%的Ap3A。实验中发现,Ap3A并非LysU二腺苷多磷酸催化反应的终产物,Ap3A可继续逆生成80%的ADP。以AMPPCP或AMPCPP代替ATP为起始底物,发现无Ap3A转化ADP反应。上述结果证明LysU具有三重催化活性:2ATP→Ap4A+2Pi→Ap3A+3Pi→2ADP+2Pi,符合"磷酸捕获机制"催化模型:活化的赖氨酰-腺苷中间物捕获核苷酸或磷酸小分子,形成对应的二腺苷多磷酸化合物。这些研究结果可为阐明不同形式功能性腺苷酸衍生物间的相互转化提供更多的信息,有助于进一步认识功能性腺苷酸分子在生命活动中的作用。
其他文献
采用水蒸气蒸馏法提取新鲜野生鱼腥草不同部位的挥发油,运用琼脂扩散法分析检测鱼腥草挥发油的抗菌作用,并用微量血凝试验测定了鱼腥草不同部位的挥发油对流感病毒增殖的抑制
随着建筑设计对地域文化的关注与增强,在大学校园建设方面,通过研究校园所在处地区历史,自然环境资源,所在城市,文化特征,建筑特色。运用造型的意识形态及文化符号等设计进行
王德威曾在台湾大学、美国哥伦比亚大学东亚系教学,现任美国哈佛大学东亚语言及文明系讲座教授。他的《被压抑的现代性——晚清小说的新论》一书从狎邪小说、侠义公案小说、
随着计算机系统在工业控制领域的广泛应用和发展,嵌入式计算机系统在工控领域的应用也显示出其无可比拟的优势和良好的发展前景。本文根据实际工程项目需要,对嵌入式实时操作
<正> 十九世纪英国女作家艾米莉·勃朗特的长篇小说《呼啸山庄》在被人们称作为伟大的作品的同时,又常常被称作为“最奇特的小说”。作者以她那充满奇情异想的诗的笔调,在小
语文是一门实践性很强的课程,它具有地域性和开放性,教师要引导学生自主开发课程资源。《义务教育语文课程标准》指出,各地区都蕴藏着自然、社会、人文等多种语文课程资源,教
通过选用中国2005—2013年省际面板数据,构建动态面板模型,实证研究经济增长和城乡收入差距对中国城镇化的影响。结果表明,样本区间内,城镇化发展本身具有很大的惯性;经济增
研究目的：通过心室肌细胞离子通道膜片钳全细胞模式的建立，熟练掌握膜片钳整个试验过程，包括心室肌细胞的急性分离，电极拉制，细胞高阻抗封接，各种电流的记录及其分析。 研究方法