氟对BALB/c小鼠胫骨及腰椎骨量的影响

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目的

观察不同剂量氟对BALB/c小鼠胫骨和腰椎骨量的影响。

方法

采用随机数字表法按体质量将64只4周龄雄性BALB/c小鼠分为对照组及低、中、高氟组,每组16只,分别饮用含氟0(对照)、25、50、100 mg/L的氟化钠(NaF)水溶液,饲喂12周后建立氟中毒小鼠模型。染氟结束后,观察各组小鼠氟斑牙发病情况,并取小鼠血液、两后肢、脊柱。采用氟离子选择电极法检测小鼠骨氟;微量酶标法检测血清碱性磷酸酶(AKP)及酸性磷酸酶(ACP)活性;透射电镜观察腰椎骨组织中成骨细胞、破骨细胞的超微结构;光镜下观察各染氟组小鼠胫骨、腰椎骨小梁的病理形态学改变,并用Image-Pro Plus(IPP)软件计算骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)来反应骨量。

结果

低、中、高氟组小鼠骨氟水平[(1 828.62 ± 102.93)、(3 308.27 ± 185.63)、(4 933.36 ± 301.16)mg/kg]均高于对照组[(775.23 ± 92.56)mg/kg,P均< 0.05]。对照组,低、中、高氟组小鼠氟斑牙检出率分别为0(0/16)、47%(7/15)、93%(14/15)、100%(16/16),组间比较差异有统计学意义(χ2= 27.23,P < 0.05)。中、高氟组小鼠血清AKP[(18.30 ± 1.99)、(24.50 ± 3.14)金氏单位/100 ml]、ACP[(11.97 ± 1.73)、(11.31 ± 1.46)金氏单位/100 ml]的活性均高于对照组[(14.63 ± 1.21)、(9.07 ± 1.47)金氏单位/100 ml,P均< 0.05]。电镜下各染氟组成骨细胞细胞器发达,含有丰富的粗面内质网和高尔基体、线粒体,核仁明显,有些成骨细胞侧面有突起与邻近成骨细胞相连,处于功能活跃期;低、中氟组破骨细胞线粒体丰富,皱褶缘清晰,并且分布有吞噬泡,功能也较活跃。光镜下小鼠胫骨石蜡切片苏木素-伊红(HE)染色显示,高氟组骨小梁%Tb.Ar(28.79 ± 8.26)与对照组(17.03 ± 3.73)相比明显增加,差异有统计学意义(P < 0.05);小鼠腰椎石蜡切片HE染色显示,低、中、高氟组骨小梁%Tb.Ar(15.87 ± 2.59、18.28 ± 0.89、21.99 ± 1.81)均高于对照组(12.06 ± 1.76,P均< 0.05)。

结论

应用BALB/c小鼠可以成功建立氟中毒的动物模型,氟所致BALB/c小鼠氟性骨损伤表现为成骨、破骨均活跃,但以成骨活性增强为主,骨形成大于骨吸收,骨量增加,并且在小鼠腰椎骨组织中表现更加明显。

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