【摘 要】
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目的 探索特异性沉默hTERT基因表达对卵巢癌细胞增殖凋亡及p53和p21表达的影响,为临床诊治提供参考依据.方法 采用分子克隆技术构建表达hTERTshRNA的载体,特异性沉默hTERT基
【机 构】
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甘肃省民勤县人民医院,甘肃武威,733399;兰州大学第二医院病理科,甘肃兰州,730030;甘肃省民勤县食品药品监督管理局,甘肃武威,733399
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目的 探索特异性沉默hTERT基因表达对卵巢癌细胞增殖凋亡及p53和p21表达的影响,为临床诊治提供参考依据.方法 采用分子克隆技术构建表达hTERTshRNA的载体,特异性沉默hTERT基因表达;WestenBlot法、MTT比色法、流式细胞仪检测抑制hTERT基因表达对卵巢癌细胞p53表达及其增殖和凋亡的影响.结果 pSIREN-hTERTshRNA转染有效阻抑A2780细胞中hTERT蛋白表达,抑制率为77％;随着A2780细胞中hTERT蛋白表达降低,p53和p21表达均明显增加;与空白对照及转染pSI-REN-Con对照质粒相比,pSIREN-hTERT转染的A2780细胞生长速度明显降低;pSIREN-hTERT转染48 h A2780细胞凋亡率为(26.76±7.42)％,明显高于对照质粒pSIREN-Con转染组(3.73±0.78)％及空白对照组(1.33±0.15)％.结论 hTERTshRNA重组质粒可特异性抑制卵巢癌细胞hTERT的表达,诱导细胞增殖抑制和凋亡,且可能与上调p53和p21的表达有关.
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